在最近几十年，基因组编辑技术（建立在基因靶向修饰的基础上，对生物基因组进行改造的一项新技术）得到了迅速的发展。其中，利用归巢内切酶（HEases）、锌指核酸酶（ZFNs）、转录激活因子样效应物核酸酶（TALENs）和最近的CRISPR/Cas9系统对各种生物基因组位点进行位点特异性裂解，不仅在实验室中被广泛应用，而且也应用于转化研究。

基因组编辑的核心问题是，如何实现特定基因组序列的特异性识别。在HEases、ZFNs和TALENs的情况下，可通过核苷酸和蛋白质序列之间的特定分子间相互作用实现，而对于CRISPR/Cas9来说，特异性是由于CRISPR RNA (crRNA)及其识别序列之间的Watson-Crick碱基配对。

尽管诸多的努力一直都专注于优化CRISPR/Cas9在各种生物体中的打靶和裂解效能，但是对脱靶效应的研究相对较少。关于基因组编辑的一个主要担忧是，编辑酶的潜在脱靶效应会带来意想不到的基因组不稳定性，如突变和染色体易位。

在这项研究中，研究人员利用一种公正的全基因组ChIP-seq方法，分析了人类基因组中CRISPR/Cas9的结合脱靶效应。令人惊讶的是，虽然Cas9能够以一种sgRNA特异性方式，结合各种包含PAM的基因组序列和保守种子序列，但与其他基因组编辑酶（如HEases、ZFNs和TALENs）相比，它的裂解脱靶是有限的。这很大程度上是因为，靶序列退火步骤额外参与活化CRISPR/Cas9复合体在其靶点上的裂解活动。另一方面，sgRNA特异性脱靶结合活性，可能会显著影响其他最近开发的方法，这些方法将CRISPR/Cas9的核苷酸序列结合特异性，与其他非裂解相关的功能（如转录调控和荧光标记）相结合。

研究证实，在人类基因组中CRISPR/Cas9具有crRNA特异性脱靶结合活性。然而，大多数的这些结合脱靶效应，在体内和体外都不能有效地裂解，表明人类基因组中的CRISPR/Cas9脱靶裂解活性是很有限的。